Ključna razlika između HPLC i UPLC je u tome što HPLC omogućava analizu čestica čija je veličina oko 5 mikrometara, dok UPLC dozvoljava mnogo manje čestice oko 2 mikrometra..
HPLC i UPLC su obje tehnike tečne hromatografije koje su korisne u odvajanju komponenti jedinjenja. Da bismo znali razliku između HPLC i UPLC, prvo moramo znati šta je HPLC. To je zato što je UPLC posebna verzija HPLC-a i možemo je lako razumjeti ako znamo šta je HPLC.
Šta je HPLC?
Izraz HPLC označava tečnu hromatografiju visokih performansi. To je tehnika koju možemo koristiti za odvajanje različitih sastojaka jedinjenja. Takođe, to je najčešće korištena tehnika za identifikaciju, kvantificiranje i odvajanje komponenti mješavine. Osim toga, ova tehnika koristi visoki pritisak za guranje rastvarača kroz kolonu. Nadalje, glavne primjene HPLC-a su u biohemiji za analizu sastojaka jedinjenja. To je idealan način za odvajanje i identifikaciju aminokiselina, nukleinskih kiselina, proteina, ugljikovodika, pesticida, ugljikohidrata, antibiotika, steroida i bezbroj drugih neorganskih supstanci.
Slika 01: HPLC sistem u laboratoriji
Ukratko, metoda rada HPLC tehnike je kako slijedi. Prvo, treba da uvedemo uzorak u tok mobilne faze u diskretnim malim količinama pomoću pumpe. Pritisak pumpe treba održavati na 40 MPa. Zatim, ova struja mobilne faze perkolira kroz kolonu HPLC. Takođe, komponente u uzorku prolaze kroz kolonu. Međutim, njihove brzine kretanja se razlikuju jedna od druge. Ova razlika nastaje zbog razlike u interakcijama između komponenti uzorka i adsorbenta unutar kolone. Ovaj adsorbent nazivamo stacionarnom fazom jer se nalazi unutar kolone (ne kreće se). Drugo, na kraju kolone možemo prikupiti uzorak koji eluira iz kolone. Tamo možemo odrediti razlike u vremenu zadržavanja za svaku komponentu u uzorku.
Šta je UPLC?
Izraz UPLC označava tečnu hromatografiju ultra visokih performansi. To je varijacija HPLC-a, ali način rada je isti. Međutim, za razliku od HPLC-a, ova metoda omogućava analizu vrlo malih čestica, kao što su male čestice veličine 2 mikrometra.
Slika 02: UPLC uređaj
Štaviše, omogućava bržu analizu. U ovoj tehnici koristimo pritisak pumpe od 100 MPa za umetanje uzorka u kolonu. Dakle, ovaj visoki pritisak potvrđuje da je cijeli uzorak uveden u kolonu. Dakle, ovo je veoma efikasno u poređenju sa HPLC.
Koja je razlika između HPLC-a i UPLC-a?
Izraz HPLC označava tečnu hromatografiju visokih performansi, dok termin UPLC označava tečnu hromatografiju ultra visokih performansi. Stoga je UPLC tehnika razvijena verzija HPLC. Dakle, način rada je isti za obje tehnike. Međutim, UPLC je efikasniji u poređenju sa HPLC jer koristi visok pritisak pumpe; pritisak pumpe za HPLC je 40 MPA dok je za UPLC 100 MPa. Dakle, ovo je razlika između HPLC i UPLC. Iznad svega, ključna razlika između HPLC i UPLC je ta što HPLC omogućava analizu čestica čija je veličina oko 5 mikrometara, dok UPLC dozvoljava mnogo manje čestice oko 2 mikrometra.
Sažetak – HPLC vs UPLC
UPLC je oblik HPLC. Dakle, metode operacije su iste. Ali, možemo pronaći neke poboljšane karakteristike u UPLC-u u poređenju sa HPLC-om. Stoga postoji određena razlika između HPLC i UPLC. Međutim, ključna razlika između HPLC i UPLC je u tome što HPLC omogućava analizu čestica čija je veličina oko 5 mikrometara, dok UPLC dozvoljava mnogo manje čestice oko 2 mikrometra.
