Ključna razlika – HPLC vs LCMS
Hajde da prvo pogledamo značenje HPLC i LCMS pre nego što analiziramo razliku između HPLC i LCMS. Kromatografija je tehnika razdvajanja u hemijskoj analizi gdje se sastojci uzorka odvajaju tokom prolaska kroz hromatografski medij. Takođe uključuje interakciju sa uzorkom, stacionarnom fazom i mobilnom fazom. HPLC je skraćenica od tečne hromatografije visokih performansi i koristi se kao metoda tečne hromatografije u analitičkoj hemiji. Kombinacija tečne hromatografije i masene spektroskopije (LCMS) razvijena je za kvantitativnu analizu odabranih biomolekula i to je veoma osetljiva, tačna i specifična procedura u poređenju sa HPLC. Ovo je ključna razlika između HPLC i LCMC. Ovaj članak će vas upoznati sa HPLC i LCMC koji se bave hemijskom analizom i diskutovati o razlikama između HPLC i LCMS.
Šta je HPLC?
Tečna hromatografija visokih performansi (HPLC) je popularna tehnika razdvajanja u analitičkoj hemiji. Uglavnom se koristi za odvajanje komponenti, za identifikaciju i kvantificiranje svake komponente u mješavini. Ranije je ova metoda bila poznata kao tečna hromatografija visokog pritiska jer je zavisila od pumpi da teče rastvarač pod pritiskom koji se sastoji od mešavine uzorka kroz kolonu napunjenu čvrstim adsorbujućim materijalom. Svaki i svaki sastojak u mješavini uzorka različito stupa u interakciju s čvrstim adsorbirajućim materijalom, što rezultira različitim brzinama protoka za različite sastojke. Ovo može dovesti do razdvajanja sastojaka dok ističu iz HPLC kolone.
HPLC se koristi za različite aplikacije kao što su analiza nivoa vitamina D u krvi, ilegalna upotreba droga sportista otkrivanjem ostataka droge u njihovom urinu, razvrstavanjem sastojaka složenog biološkog uzorka za istraživačke svrhe i analizu i proizvodnju farmaceutskih proizvoda.
Šta je LCMS?
Tečna hromatografija–masena spektrometrija (LCMS) je analitička tehnika koja kombinuje fizičke sposobnosti odvajanja tečne hromatografije sa sposobnostima masene analize masene spektrometrije (MS). Tekuća kromatografija je tehnika razdvajanja, a masena spektrometrija se koristi za analizu omjera mase i naboja nabijenih čestica. Fizičko odvajanje se obično postiže HPLC-om i alternativno, LCMS-om također poznatim kao HPLC-MS. LCMS je dominantna analitička tehnika koja ima veoma visoku tačnost, osetljivost i specifičnost u poređenju sa HPLC. Stoga je koristan u mnogim aplikacijama kao što su istraživačke svrhe, analiza lijekova, analiza hrane, itd. LCMS se uglavnom koristi za odvajanje, otkrivanje, identifikaciju i kvantifikaciju biohemijskih svojstava određenog uzorka u prisustvu složenih hemijskih mješavina.
Koja je razlika između HPLC i LCMC?
Akronim i definicija HPLC i LCMC
HPLC: HPLC je skraćenica za tečnu hromatografiju visokih performansi. To je tehnika razdvajanja koja se uglavnom koristi za odvajanje komponenti, za identifikaciju i kvantificiranje svake komponente u mješavini.
LCMS: LCMS je skraćenica za tečnu hromatografiju i masenu spektrometriju. To je analitička tehnika koja kombinuje sposobnosti fizičkog odvajanja tečne hromatografije sa sposobnostima masene analize masene spektrometrije (MS).
Karakteristike HPLC i LCMC
Klasifikacija
HPLC: Ovo je samo metoda tečne hromatografije.
LCMS: Ovo je kombinacija metode tekuće hromatografije i metode masene spektrometrije.
efikasnost
HPLC: U poređenju sa LCMS, HPLC analiza je manje efikasna i sporija.
LCMS: U poređenju sa HPLC, LCMS analiza je efikasnija i brža.
Osjetljivost
HPLC: U poređenju sa LCMS, HPLC analiza je manje osjetljiva.
LCMS: U poređenju sa HPLC, LCMS analiza je osetljivija.
Specifičnost
HPLC: U poređenju sa LCMS, HPLC analiza je manje specifična.
LCMS: U poređenju sa HPLC-om, LCMS analiza je konkretnija.
Preciznost
HPLC: HPLC daje manje precizne rezultate od LCMS za određivanje nekih hemikalija.
LCMS: LCMS daje preciznije rezultate od HPLC za određivanje nekih hemikalija.
Komponenta
HPLC: HPLC se može smatrati komponentom LCMS-a.
LCMS: LCMS se ne može smatrati komponentom HPLC-a.
Ion Source
HPLC: izvor jona ne postoji u HPLC instrumentu.
LCMS: izvor jona je prisutan u LCMS instrumentu.
Prijave
HPLC: Joni, polimeri, organski molekuli i biomolekuli mogu se analizirati pomoću HPLC-a.
LCMS: Organski molekuli i biomolekuli se mogu analizirati. Za razliku od HPLC, LCMS se može koristiti za ispitivanje nepotpuno otopljenih smjesa.
Operacija
HPLC: Dijagram HPLC instrumenta dat je na slici 1, i obično uključuje autosampler, pumpe i detektor. Uzorkovač uvodi mješavinu uzorka u mobilnu fazu (mješavina rastvarača pod pritiskom kao što su voda, acetonitril i/ili metanol) koja je prenosi u kolonu. Pumpe isporučuju željeni protok i sastav mobilne faze kroz kolonu. Kolona je napunjena adsorbentom, koji je zrnasta čvrsta čestica poput silicijum dioksida ili polimera. Detektor proizvodi signal proporcionalan količini prisustva konstituenta uzorka u koloni, što omogućava kvantificiranu analizu odabranih sastojaka uzorka. HPLC instrument je kontrolisan, a analizu podataka vrši digitalni mikroprocesor i korisnički softver.
Slika 1: Dijagram HPLC instrumenta
LCMS: Dijagram LCMS instrumenta je dat na slici 2. Ekstrakt uzorka se ubacuje u kolonu koja se sastoji od HPLC. Ova kolona zadržava uzorke metabolita na osnovu fizičkih karaktera, a različiti metaboliti teku u maseni spektrometar u različitim vremenskim intervalima. Masena spektroskopija se koristi za određivanje mase čestica, za određivanje elementarnog rasporeda molekula i za razjašnjavanje strukture molekula. Međutim, uzorak treba ionizirati kako bi se generirali nabijeni molekuli kako bi se odredio njihov omjer mase i naboja. Stoga, umjesto HPLC instrumenata, LCMS se sastoji od tri dodatna modula kao što su izvor željeza, analizator mase i detektor. Izvor jona može transformisati uzorak gasne faze u jone, a analizator mase grupirajući ione prema njihovim masama koristeći elektromagnetna polja. Konačno, detektor kvantificira vrijednosti i isporučuje podatke o svakom jonu prisutnom u uzorku. LCMS tehnika se može koristiti i za kvalitativne i za kvantitativne primjene.
Slika 2: Dijagram LCMS instrumenta
U zaključku, HPLC je metoda tečne hromatografije dok je LCMS kombinacija tečne hromatografije i masene spektrometrije. Obje ove tehnike analize imaju različite karakteristike, ali se mogu koristiti za identifikaciju i kvantificiranje sastava hrane, farmaceutskih proizvoda i drugih bioaktivnih molekula.
