Ključna razlika između diferencijalnog centrifugiranja i centrifugiranja s gradijentom gustine je ta što diferencijalno centrifugiranje odvaja čestice u mješavini na osnovu veličine čestica, dok centrifugiranje s gradijentom gustine razdvaja čestice u mješavini na osnovu gustine čestica.
Centrifugiranje je metoda razdvajanja različitih komponenti u mješavini analita. Ova metoda uključuje rotaciju uzorka oko fiksne ose, što uzrokuje stvaranje centrifugalne sile. Centrifugalna sila uzrokuje da se čestice u uzorku kreću prema dolje kroz tekući medij. Ovaj proces uzrokuje sedimentaciju čestica ili ćelija različitih veličina i gustina različitim brzinama.
Šta je diferencijalna centrifugacija?
Diferencijalno centrifugiranje je analitička tehnika u kojoj možemo odvojiti čestice u mješavini ovisno o veličini čestice. To je najjednostavniji oblik centrifugiranja i naziva se i diferencijalno peletiranje. Ova metoda je važna za razdvajanje komponenti u ćeliji. Čestice različite veličine prolaze kroz sedimentaciju različitim brzinama nakon centrifugiranja. Drugim riječima, velike čestice se talože brže od manjih čestica. Štaviše, brzina sedimentacije se može povećati povećanjem centrifugalne sile.
Kada se razmatra njena primena, diferencijalno centrifugiranje je korisno u sakupljanju ćelija ili proizvodnji sirovih subćelijskih frakcija iz homogenata tkiva. Npr. homogenat jetre sadrži jezgre, mitohondrije, lizozome i membranske vezikule. Ako ovaj homogenat centrifugiramo malom brzinom i kratko vrijeme, možemo dobiti velike jezgre u obliku peleta. Ako koristimo veliku centrifugalnu silu, onda možemo dobiti mitohondrije u peletu. Međutim, biološki uzorci su uvijek skloni kontaminaciji.
Šta je centrifugiranje s gradijentom gustine?
Centrifugiranje s gradijentom gustine je analitička tehnika u kojoj možemo odvojiti čestice u mješavini analita na osnovu gustine čestice. U ovoj metodi, tvari se koncentrišu u otopini cezijevih soli ili u saharozi. Metoda uključuje frakcioniranje čestica na osnovu gustine uzgona. Gradijent gustine u ovoj metodi je cezijumova so ili saharoza. Postoje dvije vrste centrifugiranja s gradijentom gustine: centrifugiranje sa brzinom zonla i izopikničko centrifugiranje.
Zonalno centrifugiranje uključuje medij za odvajanje koji ima slojevitu strukturu sa uskom zonom na vrhu gradijenta gustine. U ovom procesu, čestice imaju tendenciju da se kreću različitim brzinama pod centrifugalnom silom u zavisnosti od gustine čestica. Obično sve čestice proizvode pelete jer je gustina čestica veća od gradijenta gustine.
Izopikničko centrifugiranje je drugi tip metode centrifugiranja s gradijentom gustine. Počinje sa homogenim rastvorom. Pod djelovanjem centrifugalne sile, čestice u mješavini analita se kreću sve dok gustina čestica ne bude slična gradijentu gustine. Stoga ovu tehniku možemo nazvati i ravnotežnim centrifugiranjem.
Koja je razlika između diferencijalne i centrifugacije s gradijentom gustine?
Diferencijalno centrifugiranje i centrifugiranje s gradijentom gustine su dvije vrste procesa centrifugiranja uključenih u odvajanje komponenti u mješavini analita. Ključna razlika između diferencijalnog centrifugiranja i centrifugiranja s gradijentom gustine je ta što diferencijalno centrifugiranje odvaja čestice u mješavini na osnovu veličine čestica, dok centrifugiranje s gradijentom gustine razdvaja čestice u mješavini na osnovu gustine čestica.
U infografici je prikazano više razlika između diferencijalnog centrifugiranja i gradijenta gustine.
Sažetak – Diferencijalna vs centrifugiranje s gradijentom gustine
Diferencijalno centrifugiranje i centrifugiranje s gradijentom gustine su dvije vrste procesa centrifugiranja uključenih u odvajanje komponenti u mješavini analita. Ključna razlika između diferencijalnog centrifugiranja i centrifugiranja s gradijentom gustine je ta što diferencijalno centrifugiranje odvaja čestice u mješavini na osnovu veličine čestica, dok centrifugiranje s gradijentom gustine razdvaja čestice u mješavini na osnovu gustine čestica.
