Ključna razlika između HEK293 i HEK293t je u tome što je HEK293 ovjekovječena ćelijska linija izvedena iz embrionalnog ljudskog bubrega koji je transficiran s striženim ljudskim adenovirusom tipa 5DNA, dok je HEK293t ćelijska linija izvedena iz ćelijske linije HEK293 koja je originalna ćelijska linija transficirano plazmidnim vektorom koji nosi SV40 porijeklo replikacije.
Transfekcija se obično definiše kao proces uvođenja strane DNK i RNK u ćelije kako bi se uticalo na njihov genotip i fenotip. Takvo uvođenje stranih nukleinskih kiselina kroz različite biološke, hemijske i fizičke metode može promijeniti svojstva ćelije. Na kraju, ovo omogućava proučavanje funkcije gena i ekspresije proteina u kontekstu ćelije. HEK293 i HEK293t su dvije ćelijske linije koje se dugi niz godina intenzivno koriste u istraživanju ćelijske biologije zbog svoje sklonosti transfekciji.
Šta je HEK293?
HEK293 je ovjekovječena ćelijska linija izvedena iz embrionalnog ljudskog bubrega koja je transfektirana sa strignutim ljudskim adenovirusom tipa 5DNA kako bi proizvela mnoge rekombinantne proteine. HEK293 je prvobitno izolovao iz ćelija ljudskog bubrega holandski biolog Alex Van der Eb 1973. Ove ćelije su uzgajane u kulturi tkiva ženskog fetusa. Kasnije su ih transficirali striženim ljudskim adenovirusom tipa 5DNK od strane Franka Grahama, postdoktorskog saradnika u Van der Ebovoj laboratoriji. Ova ćelijska linija je nazvana HEK293 jer je to bio Frankov 293rd eksperiment.
Slika 01: HEK293
Ugradnja adenovirusnih gena u genom HEK ćelije omogućava ovim ćelijama da proizvode veliku količinu rekombinantnih proteina veoma efikasno. Štaviše, adenovirusni vektor sadrži region promotora CMV; dakle, dodatno povećava ovu efikasnost. Ova ćelijska linija je korištena kao domaćin za studije genske ekspresije. Ovu ćelijsku liniju također koristi biotehnološka industrija za proizvodnju terapeutskih proteina za gensku terapiju.
Šta je HEK293t?
HEK293t je ćelijska linija koja je izvedena iz originalne ćelijske linije HEK293 koja je transficirana plazmidnim vektorom koji nosi SV40 porijeklo replikacije kako bi se proizvela velika količina rekombinantnih proteina. HEK293t je ljudska ćelijska linija koja eksprimira mutantnu verziju SV40 velikog T antigena. HEK293t je stvoren u laboratoriji Michele Carlos na Stanfordu kroz stabilnu transfekciju ćelijske linije HEK29E plazmidom koji kodira temperaturno osjetljiv mutant SV40 velikog T antigena. Prvobitno se zvao 293/tsA1609neo. To je zato što se transfekcija koristi za stvaranje ćelijske linije koja daje otpornost na neomicin i ekspresiju alela tsA 1609 velikog T antigena SV40.
Slika 02: HEK293t
Usled ekspresije mutantne verzije SV40 velikog T antigena, transfektovani plazmidi sa SV 40 poreklom replikacije mogu u velikoj meri povećati količinu rekombinantnog proteina. Ova ćelijska linija se obično koristi u biotehnološkoj industriji za ekspresiju proteina i proizvodnju rekombinantnih retrovirusa.
Koje su sličnosti izmeđuHEK293 i HEK293t?
- HEK293 i HEK293t su dvije ćelijske linije koje su se intenzivno koristile u istraživanju ćelijske biologije zbog svoje sklonosti transfekciji.
- Obje ćelijske linije su laboratorijski izvedene.
- Ove ćelijske linije mogu značajno povećati količinu proizvodnje rekombinantnog proteina.
- Napravljene su transfekcijom embrionalnih ljudskih ćelija bubrega plazmidnim vektorom.
Koja je razlika između HEK293 i HEK293t?
HEK293 je ovjekovječena ćelijska linija izvedena iz embrionalnog ljudskog bubrega koji je transfektiran s striženim ljudskim adenovirusom tipa 5DNA. Nasuprot tome, HEK293t je ćelijska linija koja je izvedena iz originalne ćelijske linije HEK293 koja je transficirana plazmidnim vektorom koji nosi SV40 porijeklo replikacije. Dakle, ovo je ključna razlika između HEK293 i HEK293t. Nadalje, HEK293 ne izražava mutantnu verziju SV40 velikog T antigena. S druge strane, HEK293t izražava mutantnu verziju SV40 velikog T antigena.
Sljedeća infografika navodi razlike između HEK293 i HEK293t u obliku tabele za usporedbu.
Sažetak – HEK293 vs HEK293t
HEK293 i HEK293t su dvije ćelijske linije koje se intenzivno koriste u istraživanjima ćelijske biologije zbog njihovog stalnog rasta i sklonosti transfekciji. HEK293 je besmrtna ćelijska linija izvedena iz embrionalnog ljudskog bubrega koji je transficiran sa strignutim ljudskim adenovirusom tipa 5DNA, dok je HEK293t ćelijska linija koja je izvedena iz originalne ćelijske linije HEK293 koja je transficirana plazmidnim vektorom koji nosi SV40 porijeklo replikacije. Dakle, ovo rezimira razliku između HEK293 i HEK293t.
