Ključna razlika – imunocitokemija naspram imunohistokemije
Imunocitohemija (ICC) i imunohistohemija (IHC) su dvije široko korišćene tehnike u molekularnoj dijagnostici, koje identifikuju i potvrđuju pojavu i nezaraznih i zaraznih bolesti na osnovu molekularnih markera prisutnih na ćelijama. Ključna razlika između imunocitohemije i imunohistohemije je molekul koji se koristi kao postupak analize u ovim tehnikama. U ICC-u se koriste primarna i sekundarna antitijela konjugirana s markerima kao što je fluorescencija, dok se IHC, monoklonska i poliklonska antitijela koriste za dijagnostička određivanja.
Šta je imunocitohemija (ICC)?
ICC koristi primarna i sekundarna antitela vezana za markere kao što su fluorescentni markeri ili enzimi i predstavlja moćnu metodu detekcije za otkrivanje antigena prisutnih na ciljnim ćelijama koje mogu biti ili infektivne ćelijske čestice ili ćelije raka tumora. Za imunocitohemiju su potrebne tri vrste kontrola.
- Primary Antibody – kontrola koja pokazuje specifičnost vezivanja primarnog antitela za antigen
- Sekundarno antitelo – kontrola koja pokazuje da je oznaka specifična za primarno antitelo
- Kontrole etikete – prikaži da je označavanje rezultat dodane etikete, a ne rezultat endogenog označavanja.
Slika 01: Imunocitohemija označava pojedinačne proteine unutar ćelija (ovde je tirozin hidroksilaza u aksonima simpatičkih autonomnih neurona prikazana zelenom bojom).
Primarna kontrola antitijela je specifična za svako novo antitijelo i ne može se ponoviti za svaki eksperiment. Sekundarna kontrola antitijela je dizajnirana na osnovu primarnog antitijela korištenog u eksperimentu i uključena je u svaki eksperiment. Kontrola označavanja je uključena ako se promijeni uvjet postupka, promijeni uzorak ili kada se pronađe neočekivano označavanje.
Dve glavne primene ICC-a su radio imunotest (RIA) i enzimski imunosorbentni test (ELISA). Najčešće korišteno antitijelo je imunoglobulin G.
Šta je imunohistohemija (IHC)?
U imunohistohemiji, izvorni uzorak sadrži monoklonska i poliklonska antitela kako bi se utvrdilo prisustvo antigena u stranim ćelijama. Ova tehnika se zasniva na specifičnoj reakciji vezivanja antigen-antitelo. Antitijela koja se koriste u detekciji mogu biti označena različitim markerima; oni mogu biti markeri fluorescencije, radioaktivno označeni markeri ili hemijski markeri. Omogućavanjem in vitro vezivanja između antigena i ciljanog antitela, može se utvrditi prisustvo ili odsustvo određenog proteina ćelije.
Slika 02: Imunohistohemijsko bojenje normalnog bubrega sa CD10
Trenutno su naučnici uključeni u razvoj ciljnih antitela za specifične antigene prisutne u ćelijama koje se mogu razviti ili kao maligne tumorske ćelije ili antigeni prisutni u infektivnim agensima kao što je HIV.
Koje su sličnosti između imunocitokemije i imunohistokemije?
- Reakcije su vrlo specifične i precizne u ICC i IHC.
- Primjena ICC-a i IHC-a uključuje dijagnostiku raka i zaraznih bolesti.
- Sterilne uslove treba održavati u oba stanja, i treba ih izvoditi in vitro
- Obje tehnike daju ponovljive rezultate.
- Oba su brza.
- Radio označavanje, fluorescentne tehnike se koriste kao metode detekcije u ICC i IHC.
- Oba se zasnivaju na paru antigen-antitelo.
Koja je razlika između imunocitokemije i imunohistokemije?
Imunocitohemija (ICC) vs imunohistohemija (IHC) |
|
| ICC koristi primarne i sekundarne markere vezane za antitela kao što su fluorescentni markeri ili enzimi i predstavlja moćnu metodu detekcije za otkrivanje antigena prisutnih na ciljnim ćelijama. | IHC je metoda koja koristi monoklonska i poliklonska antitijela za određivanje prisustva antigena koji su posebni proteinski markeri postavljeni na površinu ćelije. |
| Izvor uzorka | |
| Uzorci dobijeni iz tkiva koja su histološki obrađena u tanke rezove koriste se u ICC-u. | IHC koristi uzorke koji se sastoje od ćelija uzgojenih u monosloju ili ćelija u suspenziji koje su deponovane na stakalcu. |
| Obrada uzorka | |
| U ICC-u, ćelije bi trebale biti propusne kako bi se olakšala penetracija antitijela do intracelularnih ciljeva. | U IHC-u, ćelije su fiksirane formalinom, umetnute u parafin prije bojenja. |
Sažetak – Imunocitohemija vs imunohistohemija
Molekularna dijagnostika se koristi za identifikaciju i potvrdu pojave i nezaraznih i zaraznih bolesti na osnovu molekularnih markera prisutnih na ćelijama. Molekularni markeri mogu biti proteini ili sekvence DNK ili RNK; razvoj tehnologija kao što su ICC i IHC otvorio je put naučnicima da identifikuju bolest i njen uzrok u ranoj fazi. I ICC i IHC zavise od specifičnih reakcija između antitijela i antigena, iako je izvor uzorka. Glavna razlika između imunocitokemije i imunohistokemije je obrada uzorka za dvije procedure.
Preuzmite PDF verziju Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Možete preuzeti PDF verziju ovog članka i koristiti ga za vanmrežne svrhe prema napomeni o citatu. Molimo preuzmite PDF verziju ovdje Razlika između imunocitokemije i imunohistokemije.
