Ključna razlika – RPMI vs DMEM
Većina istraživačkih studija uključuje uzgoj životinjskih ćelija i stoga ove studije zahtijevaju održavanje životinjskih ćelijskih linija pod posebnim uvjetima rasta. Uzgoj životinjskih ćelija se široko provodi u farmakološkim studijama za identifikaciju metabolizma lijekova, u dijagnostici bolesti i u istraživanju raka. Mediji za ćelijsku kulturu važan su aspekt kulture životinjskih ćelija. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) i Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) su dvije kulture koje se koriste u uzgoju životinjskih stanica. RPMI je medij koji se široko koristi za uzgoj stanica sisara u kulturi suspenzije. DMEM je modificirani tip bazalne podloge, sa povećanom koncentracijom aminokiselina i vitamina do četiri puta. DMEM se koristi u uzgoju ćelija u adherentnim kulturama. Ključna razlika između ova dva medija je vrsta kulture medija. RPMI se koristi na kulturama suspenzije, dok se DMEM koristi za uzgoj adherentnih ćelija.
Šta je RPMI?
RPMI ili medij Roswell Park Memorijalnog instituta se također naziva RPMI 1640. Naziv medija je dobio od instituta u kojem je medij otkriven. Ovaj medij se obično koristi u kulturi životinjskih stanica, posebno za rast stanica sisara. Prvobitno su razvijeni za uzgoj ljudskih limfocita.
Sljedeći sastojci su uključeni u RPMI.
- glukoza
- pH indikator (fenol crveno)\
- Soli (natrijum hlorid, natrijum bikarbonat, dinatrijum fosfat, kalijum hlorid, magnezijum sulfat i kalcijum nitrat)
- Aminokiseline
- Vitamini (i-inozitol, kolin hlorid, para-aminobenzojeva kiselina, folna kiselina, nikotinamid, piridoksin hidrohlorid, tiamin hidrohlorid, kalcijum pantotenat, biotin i riboflavin, cijanokobalamin)
Posebna karakteristika RPMI-a je povećana koncentracija fosfata u mediju. RPMI se koristi u atmosferi od 5% ugljičnog dioksida. To će omogućiti maksimalne i optimalne uslove za rast ćelija. pH medija se održava na 8,0 bikarbonatnim puferskim sistemom.
Slika 01: Kultura ćelija na Petrijevoj zdjelici
Primjena RPMI-a u kulturi ćelija
- Uzgoj ljudskih T i B limfocita, ćelija koštane srži i hibridoma.
- Koristi se za proučavanje ljudskih neoplastičnih ćelija.
Šta je DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) je modificirani medij koji se komercijalno priprema. Originalna tekstura srednjeg pudera je žuta. U DMEM-u koncentracija vitamina se povećava do četiri puta, čime se povećava sadržaj hranjivih tvari u podlozi.
DMEM je također modificiran dodavanjem više soli kao što su željezni nitrat, natrijum piruvat i neke neesencijalne aminokiseline kao što su serin i glicin. Formulacija glukoze u medijima je također promijenjena. Originalna formulacija se sastoji od 1000 mg/L glukoze, dok je u DMEM-u koncentracija povećana do 4500 mg/L. DMEM također zahtijeva dopunu serumske podloge jer to nije potpuna podloga. Najčešće se DMEM dopunjava fetalnim goveđim serumom (FBS). FBS obezbjeđuje potrebne proteine i faktore rasta za proces uzgoja.
PH medijuma varira nakon dodavanja natrijum bikarbonata. pH medijuma pre dodavanja natrijum bikarbonata je oko 6,80 – 7,40, dok je pH nakon dodavanja natrijum bikarbonata u rasponu od 7,60 – 8,20. Temperatura skladištenja medija je 2 – 8 0C.
Slika 02: DMEM
Prijave DMEM
- Proučiti sposobnost polioma virusa da formira plak u embrionalnim ćelijama miša.
- U studijama inhibicije kontakta.
- U istraživanju i analizi kultura pilećih ćelija.
Koje su sličnosti između RPMI i DMEM?
- I RPMI i DMEM se koriste u kulturi životinjskih ćelija.
- I RPMI i DMEM mediji su tečne formulacije.
- I RPMI i DMEM mediji sadrže esencijalne aminokiseline, vitamine i anorganske soli potrebne za rast.
- I RPMI i DMEM mediji su nekompletni. Stoga treba dodati serum.
- I RPMI i DMEM mediji koriste glukozu kao izvor ugljika.
- I RPMI i DMEM mediji imaju viši pH.
Koja je razlika između RPMI i DMEM?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI je medij koji se široko koristi za kultivaciju stanica sisara u kulturi suspenzije. | DMEM je modificirani tip bazalne podloge sa povećanom koncentracijom aminokiselina i vitamina. |
| Prisustvo dodatnih fosfata | |
| Prisutno u RPMI. | Odsutan u DMEM-u. |
| Koristite | |
|
Koristi se za kultivaciju ćelija u adherentnim kulturama. Koristi se za,
|
| Vrste kulture | |
| RPMI se koristi za suspenzijske kulture. | DMEM se koristi za kulture sa vezanim ćelijama. |
Sažetak – RPMI vs DMEM
I RPMI i DMEM se široko koriste u uzgoju životinjskih ćelija, posebno za kultivaciju životinjskih ćelijskih linija uključujući limfocite in vitro. DMEM je modificirana bazalna podloga u kojoj postoji povećana koncentracija hranjivih tvari. RPMI je razvio Roswell Park Memorial Institute, a također je medij koji se koristi u uzgoju životinjskih stanica posebno za limfocite sisara. Oba medija su komercijalno dostupna. Ovo je razlika između RPMI i DMEM.
