Ključna razlika – TLC vs HPTLC
TLC i HPTLC su dvije hemijske tehnike koje se koriste za odvajanje neisparljivih komponenti u mješavini. Ključna razlika između TLC i HPTLC je u tome što upijajući materijal u TLC ploči ima velike čestice, dok HPTLC ploče imaju vrlo male čestice adsorbujućeg materijala.
TLC je tankoslojna hromatografija. HPTLC je tankoslojna hromatografija visokih performansi, koja je napredna tehnika u poređenju sa TLC metodom.
Šta je TLC?
TLC ili tankoslojna hromatografija je osnovna hemijska tehnika koja se koristi za odvajanje neisparljivih komponenti u smeši. Ovaj eksperiment se izvodi pomoću listova stakla, plastike ili papira. Ova ploča je obložena tankim slojem celuloze ili silika gela (adsorbirajući materijal). Ovaj tanki sloj poznat je kao stacionarna faza TLC. List je poznat kao TLC ploča.
Prije eksperimenta, osnovna i gornja linija su označene olovkom na TLC ploči. Zatim se uzorak uočava duž ove linije pomoću kapilarne cijevi. Nakon toga, TLC ploča se postavlja vertikalno u mobilnu fazu. Mobilna faza je rastvarač (ili mješavina rastvarača) stavljen u posudu. Prilikom postavljanja TLC ploče u ovu mobilnu fazu, osnovnu liniju treba držati iznad granice rastvarača. U suprotnom, uzorak će biti otopljen u rastvaraču.
TLC ploča može ostati u mobilnoj fazi neko vrijeme. Zatim, s vremenom, mobilna faza se uzdiže prema ploči zbog kapilarnog djelovanja. Ako je uzorak rastvorljiv u mobilnoj fazi, podići će se prema gore zajedno s mobilnom fazom.
Princip “slično otapa slično” stoji iza ove TLC metode. To znači da se polarna jedinjenja rastvaraju u polarnim rastvaračima dok se nepolarna jedinjenja rastvaraju u nepolarnim rastvaračima. Stacionarna faza je obično silika gel ili celuloza, koja je polarno jedinjenje. Mobilna faza koja se koristi je nepolarno otapalo kao što je heksan. Stoga, ako uzorak sadrži bilo koju nepolarnu komponentu, te komponente će migrirati prema gore zajedno s mobilnom fazom. Polarne komponente će se zalijepiti za ploču. Među pokretnim komponentama, umjereno nepolarna jedinjenja će migrirati sporo, dok će visoko nepolarna jedinjenja migrirati brzo. Kada prednja strana rastvarača dođe do gornje linije TLC ploče, ploča se vadi i ostavlja da se osuši.
Slika 01: TLC tehnika
Ako su komponente u uzorku bile obojena jedinjenja, na ploči bi trebale biti šarene mrlje na različitim lokacijama. Ali ako su komponente bezbojne, trebalo bi koristiti neke druge tehnike; na primjer, prskanje ninhidrina za otkrivanje amonijaka ili amina (primarni amini i sekundarni amini).
Šta je HPTLC?
HPTLC ili tankoslojna hromatografija visokih performansi je napredni oblik tankoslojne hromatografije (TLC). Rezolucija i tačnost HPTLC su veoma visoke. Većina koraka ove tehnike može se automatizirati.
Ploče koje se koriste u HPTLC sadrže čestice silika gela vrlo male veličine i gustina pakovanja gela na ploči je velika. Površina ploče je glatka i omogućava efikasno odvajanje. Analiza je brža od TLC tehnike. Osetljivost ove metode je takođe visoka. U HPTLC, nekoliko različitih uzoraka može biti odvojeno u istoj ploči bez ikakvog koraka pripreme uzorka.
Koja je razlika između TLC i HPTLC?
TLC vs HPTLC |
|
| TLC je tankoslojna hromatografija. | HPTLC je tankoslojna hromatografija visokih performansi. |
| Tehnika | |
| To je osnovna hemijska tehnika koja se koristi za odvajanje neisparljivih komponenti u smeši. | To je napredni oblik tankoslojne hromatografije (TLC). |
| Tanjir | |
| TLC ploča može biti napravljena od papira, plastike ili stakla koja se nanosi adsorbirajućim materijalom koji ima velike čestice. | HPTLC ploče imaju vrlo male čestice adsorbirajućeg materijala. |
| Rezolucija | |
| TLC metoda daje lošu rezoluciju kada uzorak ima komponente sa sličnim svojstvima. | HPTLC metoda daje visoku rezoluciju. |
| Vrijeme | |
| TLC tehnika je tehnika koja oduzima mnogo vremena. | HPTLC daje rezultate pri većoj brzini od TLC metode. |
Sažetak – TLC vs HPTLC
HPTLC je napredni oblik TLC-a. Ključna razlika između TLC-a i HPTLC-a je u tome što TLC ploča može biti napravljena od papira, plastike ili stakla na koju se nanosi adsorbirajući materijal koji ima velike čestice, dok HPTLC ploče imaju vrlo male čestice adsorbirajućeg materijala.
