Ključna razlika – UV naspram vidljivog spektrofotometra
Nema razlike između UV i vidljivog spektrofotometra jer se oba ova naziva koriste za isti analitički instrument.
Ovaj instrument je opšte poznat kao UV-vidljivi spektrofotometar ili Ultraviolet-vidljivi spektrofotometar. Ovaj instrument koristi tehniku apsorpcione spektroskopije u ultraljubičastom i vidljivom spektralnom području.
Šta je UV spektrofotometar (ili vidljivi spektrofotometar)?
UV spektrofotometar, poznat i kao vidljivi spektrofotometar, je analitički instrument koji analizira tečne uzorke mjerenjem njegove sposobnosti da apsorbuje zračenje u ultraljubičastim i vidljivim spektralnim područjima. To znači da ova apsorpciona spektroskopska tehnika koristi svjetlosne valove u vidljivim i susjednim područjima u elektromagnetnom spektru. Apsorpciona spektroskopija se bavi ekscitacijom elektrona (kretanjem elektrona iz osnovnog u pobuđeno stanje) kada atomi u uzorku apsorbuju svetlosnu energiju.
Slika 01: UV-vidljivi spektrofotometar
Elektronske ekscitacije se odvijaju u molekulima koji sadrže pi elektrone ili nevezujuće elektrone. Ako se elektroni molekula u uzorku mogu lako pobuditi, uzorak može apsorbirati veće valne dužine. Kao rezultat toga, elektroni u pi vezama ili orbitalama bez veze mogu apsorbirati energiju svjetlosnih valova u UV ili vidljivom opsegu.
Glavne prednosti UV-vidljivog spektrofotometra uključuju jednostavan rad, visoku reproduktivnost, isplativu analizu itd. Osim toga, može koristiti širok raspon talasnih dužina za mjerenje analita.
Beer-Lambertov zakon
Beer-Lambertov zakon daje apsorpciju određene talasne dužine uzorkom. U njemu se navodi da je apsorpcija talasnih dužina od strane uzorka direktno proporcionalna koncentraciji analita u uzorku i dužini putanje (razdaljina koju pređe svetlosni talas kroz uzorak).
A=εbC
Gdje je A apsorpcija, ε je koeficijent apsorpcije, b je dužina puta, a C je koncentracija analita. Međutim, postoje neka praktična razmatranja u vezi s analizom. Koeficijent apsorpcije zavisi samo od hemijskog sastava analita. Spektrofotometar treba da ima monohromatski izvor svetlosti.
Osnovni dijelovi UV-vidljivog spektrofotometra
- Izvor svjetla
- Držač uzorka
- Difrakcijske rešetke u monohromatoru (za odvajanje različitih talasnih dužina)
- Detektor
UV-vidljivi spektrofotometar može koristiti jednostruki ili dvostruki snop svjetlosti. U spektrofotometrima sa jednim snopom, sva svjetlost prolazi kroz uzorak. Ali u spektrofotometru sa dvostrukim snopom, svjetlosni snop se dijeli na dvije frakcije i jedan snop prolazi kroz uzorak dok drugi snop postaje referentni snop. Ovo je naprednije od korištenja jednog svjetlosnog snopa.
Upotreba UV-vidljivog spektrofotometra
UV-vidljivi spektrofotometar se može koristiti za kvantificiranje otopljenih tvari u otopini. Za kvantificiranje analita kao što su prijelazni metali i konjugirana organska jedinjenja (molekule koje sadrže naizmjenične pi veze), može se koristiti ovaj instrument. Možemo koristiti ovaj instrument za proučavanje rješenja, ali ponekad naučnici koriste ovu tehniku i za analizu čvrstih tvari i plinova.
Sažetak – UV vs vidljivi spektrofotometar
UV-vidljivi spektrofotometar je instrument koji koristi tehnike apsorpcione spektroskopije za kvantifikaciju analita u uzorku. Nema razlike između UV i vidljivog spektrofotometra jer se oba naziva odnose na isti analitički instrument.
