Ključna razlika između Bradfordovog i Lowryjevog proteinskog eseja je u tome što se Bradfordov proteinski test temelji na pomaku apsorbancije boje Coomassie brilliant blue G-250, dok se Lowryjev proteinski test temelji na reakciji jona bakra (Cu+) proizveden oksidacijom peptidnih veza sa Folin-Cioc alteu reagensom.
Analiza je analitička tehnika koja pomaže u karakterizaciji glavnih funkcionalnih komponenti uzorka. Dakle, analiza može biti ili kvalitativni ili kvantitativni test. Mnoga polja, uključujući laboratorijsku medicinu, farmakologiju, biologiju životne sredine, molekularnu biologiju, biohemiju i imunologiju, rutinski koriste ovu vrstu testova. Bradford i Lowry proteinski test su dva biohemijska testa koji određuju koncentraciju proteina u rastvoru uzorka. Oba testa koriste kolorimetrijske tehnike da daju rezultate.
Šta je Bradford Protein Assay?
Bradford proteinski test je brza spektroskopska analitička procedura za analizu proteina. Pokazuje visoku preciznost pri mjerenju koncentracije proteina u otopini. Marion Bradford je uvela ovu proceduru 1976. U ovom testu, ukupna reakcija se zasniva na sastavu aminokiselina izmjerenih proteina. Drugim riječima, Bradfordov proteinski test je kolorimetrijski test. Koristi boju Coomassie brilliant blue. Dakle, ovaj kolorimetrijski proteinski test ovisi o pomaku apsorbancije boje. Coomassie brilliant blue G-250 postoji u tri formata: kationski (crveni), anjonski (plavi) i neutralni (zeleni). U kiselim uslovima, crveni oblik boje se pretvara u plavi. Potvrđuje vezivanje proteina. Ako protein nije prisutan, otopina može ostati smeđe boje.
Slika 01: Bradfordov proteinski test
Bradfordov proteinski test se razlikuje od ostalih proteinskih testova jer je manje podložan interferencijama različitih hemijskih jedinjenja prisutnih u rastvoru proteina. Ova jedinjenja uključuju natrijum, kalijum, glukozu i saharozu, itd.
Šta je Lowry Protein Assay?
Lowry proteinski test je biohemijski test koji se koristi za određivanje ukupnog nivoa proteina u rastvoru. Oliver H. Lowry je osoba koja je razvila ovaj reagens 1940. godine. Postupak prikazuje ukupnu koncentraciju proteina u otopini promjenom boje koja je proporcionalna koncentraciji proteina u otopini. Dakle, ovo je takođe kolorimetrijski proteinski test.
Reakcija između jona bakra (Cu+) nastalih oksidacijom peptidnih veza i Folin–Cioc alteu reagensa je osnova ove procedure. Takođe, ovaj reagens sadrži fosfomolibdinsku kiselinu i fosfor-volframsku kiselinu. Međutim, mehanizam reakcije Lowry proteinske analize nije dobro shvaćen. Ali to uključuje oksidaciju cisteina, triptofana i ostataka tirozina redukcijom Folin-Cioc alteu reagensa.
Slika 02: Lowry proteinski test
Ostatci cisteina doprinose apsorpciji uočenoj u Lowry proteinskom testu i reakcija rezultira sjajnom plavom molekulom; heteropoli molibden plava. Redukcija ovog molekula se mjeri apsorbancijom na 660nm. Dakle, koncentracija ostataka cisteina i triptofana koja je reducirala Folin-Cioc alteu reagens izvodi ukupnu koncentraciju proteina u otopini.
Koje su sličnosti između Bradfordovog i Lowryjevog proteinskog testa?
- Bradford i Lowry proteinski testovi određuju koncentraciju proteina u otopini.
- Obje metode su kolorimetrijske metode.
- Takođe, osjetljivost obje metode je visoka.
Koja je razlika između Bradfordovog i Lowryjevog testa proteina?
Bradford i Lowry proteinski test su dvije vrste testova koji određuju koncentraciju proteina u otopini. Bradfordov proteinski test se oslanja na pomak apsorbancije boje Coomassie brilliant blue G-250, dok Lowry proteinski test ovisi o reakciji iona bakra proizvedenih oksidacijom peptidnih veza, s Folin-Cioc alteu reagensom. Dakle, ovo je ključna razlika između Bradfordovog i Lowryjevog proteinskog testa. Bradfordov proteinski test traje 15 minuta da dobije rezultat, dok Lowery testu proteina treba 40-60 minuta da dobije rezultat. Dakle, ovo je još jedna razlika između Bradfordovog i Lowryjevog proteinskog testa. Nadalje, Bradfordov proteinski test ovisi o sastavu aminokiselina, dok Lowry proteinski test djelomično ovisi o sastavu aminokiselina. Dakle, ovo je takođe razlika između Bradfordovog i Lowryjevog proteinskog testa.
U nastavku inforafičke informacije pruža više detalja o razlici između Bradfordovog i Lowryjevog proteinskog testa.
Sažetak – Bradford vs Lowry proteinski test
Test je analitička tehnika koja se koristi za karakterizaciju glavne funkcionalne komponente uzorka. Bradford i Lowry proteinski test su dvije vrste proteinskih testova koji funkcioniraju pod kolorimetrijskim tehnikama. I Bradford i Lowry proteinski testovi određuju koncentraciju proteina u otopini. Međutim, ključna razlika između Bradfordovog i Lowry proteinskog testa leži u kolorimetrijskoj tehnici koju koriste. Bradfordov proteinski test koristi Coomassie brilliant blue G-250, dok Lowry proteinski test koristi jone bakra (Cu+) i Folin-Cioc alteu reagens. Nadalje, Bradfordova metoda daje brže rezultate od Lowryjeve proteinske analize. Međutim, obje metode su vrlo osjetljive metode i podložne su smetnjama različitih supstanci.
