Ključna razlika između izokratskog i gradijentnog eluiranja je u tome što se izokratsko eluiranje odnosi na održavanje konstantne koncentracije u mobilnoj fazi, dok se gradijentno eluiranje odnosi na održavanje različite koncentracije u mobilnoj fazi.
Izrazi izokratsko i gradijentno eluiranje se koriste u hromatografiji. Tokom hromatografskog ciklusa koristimo stacionarnu fazu, koja je nepomična supstanca, zajedno sa mobilnom fazom, pokretnom supstancom. Izokratsko i gradijentno eluiranje opisuje svojstva mobilne faze.
Šta je izokratska elucija?
Izokratsko eluiranje je termin koji se koristi u hromatografiji kada mobilna faza ima konstantnu koncentraciju. Ovdje je koncentracija mobilne faze konstantna tijekom hromatografskog procesa. U ovom procesu možemo promatrati kako širina pika raste s vremenom zadržavanja linearno u hromatogramu. Međutim, ovo dovodi do nedostatka – vrhovi koji se kasno eluiraju za kasno eluiranje postaju vrlo ravni i široki. Stoga, ove široke vrhove postaje teško prepoznati kao vrhove.
Štaviše, u izokratskom eluiranju, selektivnost se ne mijenja prema dimenzijama kolone. To znači da selektivnost ne ovisi o promjenama dimenzija kolone. Ovdje se dužina i prečnik smatraju dimenzijama stuba. Stoga, vrhovi eluiraju istim redoslijedom.
Šta je Gradient Elution?
Gradijentsko eluiranje je termin koji se koristi u hromatografiji kada mobilna faza ima promjenjivu koncentraciju. Drugim riječima, koncentracija mobilne faze ne mora ostati konstantna. Na primjer, u HPLC-u, uobičajena metoda odvajanja koristi 10% metanola na početku i završava na 90%, postupnim povećanjem koncentracije. Mobilna faza ima dvije komponente: slab rastvarač i jak rastvarač. Slab rastvarač omogućava da se otopljena supstanca polako eluira, dok jaka otapala izaziva brzo eluiranje otopljene supstance. U hromatografiji reverzne faze koristimo vodu kao slabi rastvarač i organski rastvarač kao jak rastvarač.
Slika 01: HPLC
Štaviše, metoda gradijentnog eluiranja smanjuje komponente kasnije eluiranja kako bi one brže eluirale, dajući uski vrh na hromatogramu. Ova metoda također poboljšava oblik vrha i visinu vrha. Nadalje, u tehnici gradijentnog eluiranja, redoslijed eluiranja se mijenja s promjenama dimenzija kolone.
Koja je razlika između izokratskog i gradijentnog eluiranja?
Izrazi izokratsko i gradijentno eluiranje se koriste u hromatografiji. Izokratsko i gradijentno eluiranje opisuju svojstva mobilne faze. Ključna razlika između izokratskog i gradijentnog eluiranja je u tome što se izokratsko eluiranje odnosi na održavanje konstantne koncentracije u mobilnoj fazi, dok se gradijentno eluiranje odnosi na održavanje različite koncentracije u mobilnoj fazi.
U tehnici izokratskog eluiranja, širina pika se linearno povećava sa vremenom zadržavanja. Međutim, u tehnici gradijentnog eluiranja, zadržavanje komponenti koje se kasnije eluiraju je smanjeno, tako da eluiranje postaje brže i daje uske vrhove. Osim toga, kod izokratske elucije selektivnost ne zavisi od dimenzija kolone, ali kod gradijentnog eluiranja selektivnost se mijenja sa promjenom dimenzija kolone.
Sljedeća tabela sumira razliku između izokratskog i gradijentnog eluiranja.
Sažetak – Isocratic vs Gradient Elution
Izokratsko eluiranje i gradijentno eluiranje opisuju svojstva mobilne faze. Ključna razlika između izokratskog i gradijentnog eluiranja je u tome što se izokratsko eluiranje odnosi na održavanje konstantne koncentracije u mobilnoj fazi, dok se gradijentno eluiranje odnosi na održavanje različite koncentracije u mobilnoj fazi.
