Ključna razlika između elektroporacije i mikroinjekcije je ta što je elektroporacija tehnika koja koristi električni impuls visokog napona za isporuku DNK u ćelije domaćina, dok je mikroinjekcija tehnika koja koristi staklenu iglu ili mikropipetu sa finim vrhom za isporuku DNK u ćelije domaćina.
Transformacija je proces kojim se strana DNK prenosi u ćelije domaćina. Transformacijom se genetski sastav organizma može promijeniti. Postoje različite hemijske, biološke i fizičke metode transformacije. Neke su direktne metode, dok su neke indirektne metode. Elektroporacija i mikroinjekcija su dvije fizičke metode koje su metode direktne transformacije. Elektroporacija koristi električno polje da izazove mikroskopske pore u biološkim ćelijskim membranama kako bi se DNK ugradila u ćelije domaćina. Mikroinjekcija, s druge strane, direktno isporučuje DNK pomoću mikropipete ili staklene igle sa finim vrhom.
Šta je elektroporacija?
Elektroporacija je tehnika transformacije koja isporučuje DNK u biljne ćelije i protoplaste. Ova tehnika koristi električni impuls visokog napona. Biljni materijali se inkubiraju u puferskom rastvoru koji sadrži DNK. Zatim se otopina podvrgava visokonaponskom električnom impulsu. Pore izazvane visokim naponom stvaraju se u biljnim ćelijskim membranama i kroz ove pore DNK migrira unutar ćelija i integriše se sa biljnom genomskom DNK. Efikasnost ove metode zavisi od biljnog materijala i uslova tretmana.
Slika 01: Elektroporacija
Kada se transformacija izvrši elektroporacijom, samo 40 do 50% ćelija dobije DNK. Štaviše, samo 50% transformiranih ćelija može preživjeti pod ovom metodom. Međutim, ova metoda je jednostavna za izvođenje i ne mijenja biološku strukturu ili funkciju stanica. Štaviše, može se koristiti za širok spektar ćelija.
Šta je mikroinjekcija?
Mikroinjekcija je tehnika transformacije koja je posebno korisna pri uvođenju DNK u velike ćelije. Ova metoda koristi staklenu iglu s finim vrhom ili mikropipetu za isporuku DNK u biljne protoplaste ili životinjske stanice (oocite, jajašca i embrije). Zapravo, ova metoda je prikladnija za pravljenje transgenih životinja kao što su miševi. U ovoj metodi, DNK se ugrađuje direktno u jezgro ili citoplazmu.
Slično elektroporaciji, mikroinjekcija je tehnika direktne transformacije. Mikroinjekcija se izvodi pod specijaliziranim mikroskopom. Kompjuterizovana kontrola držanja pipete, igle, mikroskopa i video tehnologije povećala je efikasnost ove tehnike. Prilikom ubrizgavanja DNK, boja se može koristiti za laku identifikaciju transformiranih stanica. Stoga, nema potrebe za korištenjem posebne metode za identifikaciju transformiranih ćelija. Ono što je najvažnije, postupak mikroinjekcije ne zahtijeva marker gen.
Slika 02: Mikroinjekcija
Štaviše, ova metoda je vrlo efikasna i ponovljiva. Međutim, ova metoda je skupa, dugotrajna i zahtijeva stručnost. Takođe, samo mali broj ćelija može se tretirati ovom metodom.
Koje su sličnosti između elektroporacije i mikroinjekcije?
- I elektroporacija i mikroinjekcija su dvije vrste tehnika transformacije.
- Ove metode isporučuju DNK u biljne ćelije i protoplaste.
- One su direktne metode.
- Štaviše, to su fizičke ili mehaničke metode.
- Obje metode su korisne pri proizvodnji transgenih biljaka i životinja.
Koja je razlika između elektroporacije i mikroinjekcije?
Tehnika elektroporacije koristi električno polje za uvođenje DNK, dok je tehnika mikroinjekcije mikropipeta ili staklena igla s finim vrhom za uvođenje DNK. Dakle, ovo je ključna razlika između elektroporacije i mikroinjekcije. Štoviše, elektroporacija se uglavnom koristi za biljne stanice i protoplaste, dok se mikroinjekcija uglavnom koristi za životinjske stanice. Osim toga, elektroporacija nije toliko dugotrajna kao mikroinjekcija.
Infografika ispod sumira razlike između elektroporacije i mikroinjekcije u obliku tabele.
Sažetak – Elektroporacija vs mikroinjekcija
Elektroporacija i mikroinjekcija su dvije fizičke metode prijenosa gena. Elektroporacija koristi visokonaponsko električno polje, dok mikroinjekcija koristi staklenu iglu ili mikropipetu. Dakle, ovo je ključna razlika između elektroporacije i mikroinjekcije. Međutim, obje metode direktno uvode egzogenu DNK u ćelije domaćina.
