Ključna razlika između Elise i Elispota je u tome što je Elisa enzimski imunosorbentni test koji određuje ukupnu koncentraciju izlučenih signalnih proteina, dok je Elispot enzimski imunosorbentni test koji detektuje pojedinačne ćelije koje luče citokine.
Elisa i Elispot su dva enzimska imunosorbentna testa koja se široko koriste u medicini, biljnoj patologiji, biotehnologiji i različitim farmaceutskim industrijama. U ovim tehnikama, proteinski analit se detektuje pomoću antitijela usmjerenog protiv njega. Elisa je najpopularniji enzimski imunosorbentni test koji se koristi u laboratorijama. S druge strane, Elispot je enzimski imunosorbentni test koji se ne koristi umjesto Elisa, već se koristi uz Elisa u laboratorijama.
Šta je Elisa test?
Elisa je enzimski imunosorbentni test koji određuje ukupnu koncentraciju izlučenih signalnih proteina. To je široko korišćeni analitičko biohemijski test koji su prvi opisali Engvall i Perlmann 1971. Ova tehnika koristi tip enzimskog imunoeseja u čvrstoj fazi za otkrivanje prisustva specifičnog proteina u tečnom uzorku koristeći antitela usmerena protiv ovog specifičnog proteina. Ovaj test je najčešće korišten dijagnostički alat u medicini, biljnoj patologiji i biotehnologiji.
Mehanizam ELISA testa
U većini ELISA testova, nepoznata količina antigena je imobilizirana na čvrsti nosač (mikrolitrska ploča) na početku. Zatim se odgovarajuće primarno antitijelo nanosi preko čvrste potporne površine. Ovo antitijelo stvara kompleks sa antigenom (kompleks antigen-antitijelo). Primarno antitelo vezano za antigen može se otkriti sekundarnim antitelom koje je povezano sa enzimom putem biokonjugacije. U završnom koraku Elisa testa dodaje se supstanca koja sadrži supstrat enzima. Ako postoji pravilno vezivanje primarnog antitijela za antigen, supstrat proizvodi vidljivu promjenu boje. Na kraju, ovo kvantificira antigen u uzorku.
Slika 01: Različite vrste Elisa
Dalje, postoje različiti pristupi Elisi, kao što su direktna Elisa i indirektna Elisa. Trenutno se razni Elisa testovi koriste za otkrivanje ljudskih patogena kao što su Mycobacterium tuberculosis, rotavirus, virus hepatitisa B, virus hepatitisa C, enterotoksin koji proizvodi E.coli, HIV i SARS-CoV-2.
Šta je Elispot test?
Elispot je enzimski imunosorbentni test koji otkriva pojedinačne ćelije koje luče citokine. Cecil Czerkinsky prvi je opisao ELISpot 1983. godine. To je vrsta analize koja se fokusira na kvantitativno mjerenje učestalosti lučenja citokina za jednu ćeliju. Takođe je klasifikovana kao tehnika koja koristi antitela za otkrivanje biološkog ili hemijskog proteinskog analita. Fluorospot test je varijacija Elispot testa, koji koristi fluorescenciju za analizu više analita (tajnijih proteina).
Mehanizam Elispot testa
U ovom mehanizmu, monoklonska antitijela specifična za citokine se u početku dodaju u jažice mikrolitarskih ploča. Zatim se željene ćelije koje se posmatraju dodaju u jažice. Kasnije se ćelije inkubiraju. Tokom ćelijske inkubacije, ćelijama je dozvoljeno da reaguju na bilo koji podražaj i luče citokin. Citokini koje su lučile ćelije inkubirane će se vezati za antitela jer su ćelije okružene monoklonskim antitelima specifičnim za citokine.
Slika 02: Elispot analiza
Da bi se otkrila ova monoklonska antitijela specifična za citokine, u bunar se dodaju biotinilirana specifična antitijela za detekciju. Biotinilirana specifična antitijela za detekciju hvataju monoklonska antitijela specifična za citokine u jažice. Štaviše, konjugati streptavidin-enzim se dodaju u jažice kako bi se vezali sa antitijelima za detekciju. U završnom koraku, specifični supstrati se dodaju u jažice. Reakcije enzimskih konjugata i supstrata stvaraju različite mrlje u jamicama. Ove različite tačke se očitavaju na automatizovanom ELISpot čitaču. Na kraju, ovo će dodatno izračunati učestalost lučenja citokina.
Koje su sličnosti između Elise i Elispota?
- Obojica su enzimski imunosorbentni testovi.
- Oba testa otkrivaju specifične proteinske analite.
- Ovi testovi koriste specifična antitijela za identifikaciju proteinskih analita.
- Oba testa koriste enzime i supstrate.
- Koriste se kao dijagnostički alat u medicinskim laboratorijama.
Koja je razlika između Elise i Elispota?
Elisa je enzimski imunosorbentni test koji određuje ukupnu koncentraciju izlučenih signalnih proteina. S druge strane, Elispot je enzimski imunosorbentni test koji mjeri pojedinačne ćelije koje luče citokine. Dakle, ovo je ključna razlika između Elise i Elispota. Štaviše, u Elisa testu, antigen se prvo imobiliše na mikrolitarske jažice. Nasuprot tome, u Elispot testu, antitijelo se prvo imobilizira na mikrolitarske jažice. Dakle, ovo je još jedna razlika između Elise i Elispota.
Infografika ispod predstavlja detaljnu analizu razlike između Elise i Elispot u obliku tabele.
Sažetak – Elisa vs Elispot
Elisa i Elispot su dva enzimsko-vezana imunosorbentna testa koja se široko koriste u medicini, biljnoj patologiji, biotehnologiji i različitim farmaceutskim industrijama. Elisa detektuje prisustvo liganda (proteina) u tečnom uzorku koristeći antitela usmerena protiv liganda koji se meri. Elispot analiza je široko korištena metoda za praćenje imunoloških odgovora. Otkriva pojedinačne ćelije koje luče citokine koristeći antitijela. To je i imunotest i tehnika biološke analize. Dakle, ovo je sažetak razlike između Elise i Elispota.
