Ključna razlika između izolacije DNK i RNK je u tome što je izolacija DNK procedura u kojoj se iz biološke ćelije ekstrahuje vrsta nukleinske kiseline koja se zove DNK, dok je izolacija RNK procedura u kojoj se izvlači vrsta nukleinske kiseline koja se zove RNK ekstrahovan iz biološke ćelije.
Izolacija nukleinske kiseline je početna tačka u velikom nizu nizvodnih aplikacija. Visok kvalitet nukleinskih kiselina u početnim uzorcima je ključni faktor za uspjeh kasnijih daljnjih primjena. Izolacija nukleinske kiseline može se definirati kao niz koraka za dobivanje nukleinske kiseline u uzorku čistoće koji se može koristiti za različite korake dalje primjene. Svrha ekstrakcije nukleinske kiseline je dezintegracija ćelijske membrane i postizanje maksimalne eliminacije lipida i proteina kako bi se dobile čiste nukleinske kiseline kao što su DNK ili RNA.
Šta je DNK izolacija?
Izolacija DNK je rutinska procedura u kojoj se iz biološke ćelije ekstrahuje vrsta nukleinske kiseline koja se zove DNK. Izolacija DNK se izvodi ekstrahiranjem DNK iz krvi, smrznutih uzoraka tkiva i parafinskih blokova tkiva. Postoje tri glavna koraka u izolaciji DNK, uključujući lizu ćelija, ekstrakciju DNK i precipitaciju. U ćelijskoj lizi, ćelije u uzorku se odvajaju jedna od druge često fizičkim sredstvima kao što je mljevenje ili vorteksiranje i stavljaju se u otopinu koja sadrži sol. Obično, pozitivno nabijeni ioni natrija u soli pomažu u zaštiti negativno nabijenih fosfatnih grupa koje se protežu duž okosnice DNK. Kasnije se dodaje deterdžent koji razbija lipide u ćelijskoj membrani i jezgri, koji oslobađaju DNK dok se te membrane poremete.
Slika 01: Izolacija DNK
Izvodi se ekstrakcija DNK kako bi se dobio čist uzorak DNK. Često se dodaje enzim proteaze za razgradnju proteina povezanih s DNK i drugih ćelijskih proteina. Štaviše, neki od ćelijskih ostataka mogu se ukloniti filtriranjem uzorka. Konačno, DNK se precipitira upotrebom alkohola. Nadalje, ako ima puno DNK, može se primijetiti škrt bijeli talog na kraju postupka.
Šta je RNK izolacija?
RNA izolacija je postupak u kojem se iz biološke ćelije ekstrahuje vrsta nukleinske kiseline koja se zove RNK. Ovaj postupak je često komplikovan prisustvom enzima ribonukleaze u ćelijama i tkivima koji razgrađuju RNK. Nekoliko metoda se koristi u molekularnoj biologiji za izolaciju RNK iz uzoraka, kao što je ekstrakcija gvanidinijum-tiocijanat-fenol-hloroform.
Slika 02: Izolacija RNK
RNA izolacija se obično sastoji od nekoliko koraka, uključujući lizu i homogenizaciju ćelija, gašenje biohemijskih procesa, razdvajanje nukleinskih kiselina, vađenje RNK, sirovo prečišćavanje i procenu kvaliteta RNK. Metoda lize i eluiranja zasnovana na filter papiru ima visok kapacitet propusnosti u ekstrakciji RNK. Nadalje, ekstrakcija RNK u tekućem dušiku korištenjem m altera i tučka je također vrlo korisna metoda jer sprječava aktivnost ribonukleaze.
Koje su sličnosti između izolacije DNK i RNK?
- Izolacija DNK i RNK su dvije vrste postupaka izolacije nukleinske kiseline.
- Obje procedure imaju slične osnovne korake, kao što su liza stanica, ekstrakcija i pročišćavanje.
- Ove procedure izoluju važne tipove nukleinskih kiselina koje imaju niz primjena.
- Izvode se u laboratorijskim postavkama.
- Mogu se izvesti korištenjem proizvedenih kompleta.
Koja je razlika između izolacije DNK i RNK?
U izolaciji DNK, vrsta nukleinske kiseline koja se zove DNK ekstrahuje se iz biološke ćelije, dok se u izolaciji RNK iz biološke ćelije ekstrahuje vrsta nukleinske kiseline koja se zove RNK. Dakle, ovo je ključna razlika između izolacije DNK i RNK. Nadalje, izolacija DNK se normalno provodi na pH 7 do 8, dok se izolacija RNK normalno provodi pri pH 4,5.
Infografika ispod predstavlja razlike između izolacije DNK i RNK u obliku tabele za usporedbu.
Sažetak – DNK vs RNA izolacija
Izolacija DNK i RNK su dvije vrste postupaka izolacije nukleinske kiseline. Izolacija DNK je postupak tokom kojeg se DNK ekstrahuje iz biološke ćelije. Izolacija RNK je postupak tokom kojeg se RNK ekstrahuje iz biološke ćelije. Dakle, ovo je ključna razlika između izolacije DNK i RNK.
