Ključna razlika između CLIA-e i ECLIA-e je u tome što CLIA koristi hemijsku metodu za generisanje hemiluminiscencije, dok ECLIA koristi elektrohemijsku metodu za generisanje signala hemiluminiscencije u tehnici imunotestiranja.
Imunotestovi se široko koriste u identifikaciji i kvantifikaciji proteina povezanih sa bolestima ili infekcijama. Stoga se prvenstveno oslanjaju na koncept vezivanja antitijelo-antigen. Postoji mnogo tipova imunotestova, a hemiluminiscentni imunoeseji je jedna takva razvojna tehnika u nastajanju. I CLIA i ECLIA koriste hemiluminiscentne indikatore.
Šta je CLIA?
Chemiluminescent Immunoassay (CLIA) je vrsta imunoeseja koji koristi luminiscentni molekul za detekciju. Luminiscencija koju emituje molekul detektuje se na spektrofotometru, uglavnom na talasnoj dužini između 300 – 800 nm. Hemiluminiscencija uzrokuje ekscitaciju atoma, a tehnika identificira eksergonske kemijske reakcije kao najprikladniji izvor energije za proizvodnju ekscitacije.
CLIA tehnika se odvija u dvije glavne metode kao direktna CLIA tehnika i indirektna CLIA tehnika. Direktna CLIA tehnika koristi direktne markere luminofora koji su vezani za metu, dok indirektna CLIA metoda koristi enzimske markere. Direktni markeri luminofora uključuju acidum i rutenijum estere dok indirektni markeri uključuju alkalnu fosfatazu sa supstratom adamantil 1, 2-dioksetanaril fosfata (AMPPD) i peroksidazu hrena sa luminolom ili njegovim derivatima kao supstratom.
Slika 01: Hemiluminiscencija
Ključne prednosti CLIA-e su širok dinamički raspon funkcionalnosti, visok intenzitet isporuke signala, odsustvo pozadinskih smetnji, visoka specifičnost, brzina, stabilnost i kompatibilnost sa različitim protokolima analize. Nasuprot tome, njihova visoka cijena i ograničenja u pogledu detekcije antigena i test panela su nedostaci CLIA-e.
Šta je ECLIA?
Electrochemiluminescence Immunoassay (ELCIA) je nova tehnika razvoja imunoeseja koja koristi koncept elektrohemiluminiscencije. U konceptu elektroluminiscencije, međuprodukti nastaju elektrohemijski. Ovi elektronski generisani međuprodukti zatim dostižu pobuđeno stanje i rezultiraju emisijom svetlosti. Talasna dužina u kojoj se emituje svjetlost odgovara energetskom jazu. Hemiluminiscencija se, dakle, proizvodi zahvaljujući jednom ili više reaktanata koji se elektrohemijski proizvode na elektrodi.
ECLIA je korisna analitička aplikacija visoke osjetljivosti i specifičnosti. Uglavnom se koristi za identifikaciju proteina povezanih s različitim patološkim i medicinskim stanjima. Njegove ključne prednosti uključuju širi dinamički raspon, svestranost, prostornu i vremensku kontrolu primjenom elektrodnih potencijala, visoku osjetljivost do pikomolarnih raspona. Međutim, nedostatak je činjenica da zahtijeva stručno rukovanje i povezana visoka cijena.
Koje su sličnosti između CLIA-e i ECLIA-e?
- Obe tehnike se oslanjaju na koncept vezivanja antigen-antitelo.
- Štaviše, oba se uglavnom koriste za dijagnostiku bolesti na osnovu kvantifikacije proteina.
- Obje su osjetljive i specifične metode kompleta.
- Koriste koncept hemiluminiscencije za detekciju.
- Mogu se automatizirati.
- Oba zahtevaju spektrofotometar za detekciju.
- Oba imaju širok dinamički raspon.
- To su skupe tehnike.
Koja je razlika između CLIA-e i ECLIA-e?
CLIA je tehnika imunoeseja koja koristi teoriju hemiluminiscencije, dok je ECLIA tehnika imunoeseja koja koristi teoriju elektrohemije u kombinaciji sa hemiluminiscencijom. Dakle, ovo je ključna razlika između CLIA-e i ECLIA-e. Stoga CLIA koristi hemijske reakcije koje dovode do razvoja hemiluminiscentnih signala, dok ECLIA koristi elektrohemijske reakcije koje dovode do razvoja hemiluminiscentnih signala.
Donja infografika razlike između CLIA i ECLIA pokazuje više poređenja između obje tehnike.
Sažetak – CLIA vs ECLIA
CLIA i ECLIA su obje tehnike koje igraju važnu ulogu u dijagnostici bolesti. To su napredne metode imunodijagnostike zasnovane na konceptu vezivanja antitelo-antigen. Ključna razlika između CLIA i ECLIA je metoda generiranja hemiluminiscencije. Dok CLIA koristi hemijske reakcije za generisanje hemiluminiscencije nakon vezivanja antitelo-antigen, ECLIA koristi elektrohemijske reakcije za stvaranje hemiluminiscencije. Međutim, obje tehnike su brze i specifične.
