Ključna razlika između ionske izmjene i hromatografije s isključenjem po veličini je u tome što se ionsko-izmjenjivačka hromatografija koristi za analizu jonskih supstanci prema naboju, dok se hromatografija isključivanja po veličini koristi za analizu velikih molekula prema veličini.
Hromatografija je analitička tehnika koja se može koristiti za analizu različitih mješavina. Kromatografske tehnike su imenovane prema parametru koji se koristi za analizu tvari – npr. hromatografija isključivanja veličine, hromatografija izmene jona, itd.
Šta je ionsko-izmjenjivačka hromatografija?
Hromatografija ionske izmjene je analitička tehnika u kojoj možemo analizirati jonske supstance. Često je korisno analizirati neorganske anjone i katione (tj. hloridne i nitratne anjone i kalijeve, natrijeve katione). Iako to nije vrlo uobičajena metoda, pomoću nje možemo analizirati organske ione. Štaviše, ovu tehniku možemo koristiti za pročišćavanje proteina jer su proteini nabijeni molekuli pri određenim pH vrijednostima. Ovdje koristimo čvrstu stacionarnu fazu za koju se nabijene čestice mogu vezati. Na primjer, možemo koristiti smole polistiren-divinilbenzen kopolimere kao čvrstu podlogu.
Slika 01: Teorija iza hromatografije s izmjenom jona
Da bismo ovo dodatno objasnili, stacionarna faza ima fiksirane jone kao što su sulfatni anjoni ili kvaternarni amin kationi. Svaki od njih treba da se poveže sa kontra jonom (jonom suprotnog naelektrisanja) ako želimo da zadržimo neutralnost ovog sistema. Ako je protivjon katjon, onda sistem nazivamo smolom za kationsku izmjenu. Ali, ako je protivjon anjon, sistem je anjonska izmjenjivačka smola. Štaviše, postoji pet glavnih koraka u hromatografiji sa izmenom jona:
- Početna faza
- Adsorpcija cilja
- Početak elucije
- Kraj elucije
- Regeneracija
Šta je hromatografija isključenja veličine?
Size exclusion kromatografija ili SEC je analitička tehnika u kojoj se molekuli u mješavini mogu razdvojiti prema njihovoj veličini i težini molekula. Obično radi s velikim molekulima zvanim makromolekule. Obično se za analizu koristi vodeni rastvor. Tada se zove gel filtracijska hromatografija. Kada je organski rastvarač, to se zove gel permeacijska kromatografija.
Gel filtracijska hromatografija je oblik hromatografije isključivanja veličine u kojoj koristimo vodeni rastvor kao mobilnu fazu. Stoga je mobilna faza koju često koristimo u ovoj tehnici vodeni pufer. Takođe, za ovo razdvajanje koristimo hromatografsku kolonu, a kolonu treba da upakujemo poroznim perlama. Obično su sephadex i agaroza korisni kao porozni materijal. Dakle, ovi materijali su stacionarna faza našeg eksperimenta. Štaviše, možemo koristiti veličinu pora ovih kuglica da odredimo veličinu makromolekula koje odvajamo. Međutim, to je samo procjena.
Slika 02: Aparat za hromatografiju bez veličine
Gel permeacijska hromatografija je oblik hromatografije isključivanja veličine u kojoj koristimo organski rastvarač kao mobilnu fazu. Stoga za ovu svrhu možemo koristiti otopine kao što su heksan i toluen. Stacionarna faza je porozan materijal, isti kao u gel filtracionoj hromatografiji. Ova tehnika se često primjenjuje na polimere i druge organski rastvorljive materijale. Metoda djelovanja tehnike je slična onoj kod gel filtracijske hromatografije.
Koja je razlika između ionske izmjene i hromatografije isključenja veličine?
Hromatografija je analitička tehnika koja se može koristiti za analizu različitih mješavina. Ključna razlika između ionske izmjene i hromatografije isključenja po veličini je u tome što se ionska izmjenjivačka hromatografija koristi za analizu ionskih supstanci prema naboju, dok se hromatografija isključivanja po veličini koristi za analizu velikih molekula prema veličini.
U nastavku infografika daje više informacija o razlici između ionske izmjene i hromatografije isključivanja veličine.
Sažetak – Ionska izmjena naspram hromatografije isključenja veličine
Hromatografija je analitička tehnika koja se može koristiti za analizu različitih mješavina. Ključna razlika između ionske izmjene i hromatografije isključenja po veličini je u tome što se ionska izmjenjivačka hromatografija koristi za analizu ionskih supstanci prema naboju, dok se hromatografija isključivanja po veličini koristi za analizu velikih molekula prema veličini.
