Ključna razlika između RIA-e i ELISA-e je ta što je radioimunotest (RIA) tehnika imunotestiranja koja koristi radioizotope za otkrivanje kompleksa antigen-antitijelo, dok je enzimski imunosorbentni test (ELISA) tehnika imunotestiranja koja koristi enzime za otkrivanje antigena -kompleksi antitijela.
Detekcija specifičnih proteina kao što su antigeni je izuzetno važna u dijagnostici bolesti. Stoga su RIA i ELISA dvije tehnike imunotestiranja koje se koriste u laboratorijama za brzo otkrivanje specifičnih proteina, posebno antigena. Općenito, specifično antitijelo se vezuje za ciljni antigen i formira vidljivi kompleks poznat kao precipitin. Ova antitijela i kompleksi antigena mogu se identificirati različitim tehnikama. Tehnika detekcije kompleksa antigen-antitijelo korištenjem radioizotopa poznata je kao RIA, a tehnika detekcije kompleksa antigen-antitijelo korištenjem enzima poznata je kao ELISA.
Šta je RIA?
Radioimunotest (RIA) je tehnika imunotestiranja koja detektuje komplekse antigena i antitijela pomoću radioizotopa. Rosalyn Sussman Yalow razvila je ovu tehniku 1960. godine uz pomoć Solomona Bersona. Za ovo izvanredno otkriće, Rosalyn Sussman Yalow je 1977. godine dobila Nobelovu nagradu za medicinu. Obično, u radioimunotesti, poznata količina antigena se prvi put učini radioaktivnom. Ova tehnika često koristi gama-radioaktivne izotope joda, zvane 125-I, za označavanje antigeni. Ovi radioizotopi se normalno vezuju za tirozinsku aminokiselinu antigena. Zatim se radioaktivno obeleženi antigen pomeša sa antitelom. Kao rezultat, radioaktivno obilježeni antigen i antitijelo se specifično vezuju jedno za drugo.
Kasnije se dodaje uzorak seruma koji sadrži nepoznatu količinu istog antigena. Ovo uzrokuje da se neobilježeni antigen iz seruma takmiči sa radioaktivno označenim antigenom za mjesta vezivanja antitijela. Kako se koncentracija neobilježenog antigena povećava, veći dio se veže za antitijelo, zamjenjujući radioaktivno označenu varijantu. Dakle, smanjuje omjer radioaktivno obilježenog antigena vezanog za antitijelo prema slobodnom radioaktivno obilježenom antigenu. Na kraju postupka, vezani antigeni se odvajaju. Konačno, radioaktivnost slobodnih antigena u preostalom supernatantu se mjeri pomoću gama brojača.
Šta je ELISA?
ELISA je tehnika imunotestiranja koja detektuje komplekse antigena i antitijela korištenjem enzima. To je biohemijski analitički test koji su prvi opisali Engvall i Perlmann 1971. U većini jednostavnih oblika ELISA tehnika, antigeni uzorka pacijenta su pričvršćeni za čvrstu površinu. Zatim se odgovarajuće antitijelo nanosi na površinu, tako da se može vezati za antigen.
Slika 01: ELISA
Ovo specifično antitijelo je povezano sa enzimom. Kasnije se sva nevezana antitijela uklanjaju pranjem deterdžentom. U završnom koraku ove tehnike dodaje se supstrat enzima. Ako postoji pravilno vezivanje antigena i antitijela, naknadna reakcija proizvodi signal boje koji se može detektirati, najčešće promjenu boje.
Koje su sličnosti između RIA-e i ELISA-e?
- RIA i ELISA su tehnike imunotestiranja.
- Obje tehnike posjeduju formiranje kompleksa antigena i antitijela.
- Ove tehnike se mogu koristiti za otkrivanje nepoznatih proteina u uzorcima.
- Obe se koriste u dijagnostici bolesti u laboratorijama.
- Obje su vrlo specifične i osjetljive tehnike.
Koja je razlika između RIA-e i ELISA-e?
RIA je tehnika imunotestiranja za detekciju kompleksa antigen-antitijelo korištenjem radioizotopa. ELISA je tehnika imunotestiranja za detekciju kompleksa antigen-antitijelo korištenjem enzima. Dakle, ovo je ključna razlika između RIA i ELISA. Štaviše, u RIA tehnici, antigen je obeležen, ali u ELISA testu, antitelo je obeleženo. Nadalje, u RIA tehnici, molekuli za obilježavanje su radioizotopi, dok su u ELISA-i molekuli za obilježavanje enzimi. Dakle, ovo je još jedna razlika između RIA i ELISA-e.
Infografika ispod pokazuje više razlika između RIA i ELISA u tabelarnom obliku.
Sažetak – RIA vs ELISA
Imunotestovi igraju veoma važnu ulogu u različitim bioanalitičkim postavkama, kao što su klinička dijagnostika, biofarmaceutske analize, praćenje životne sredine, biosigurnost i testiranje hrane. Od 1960-ih godina razvijen je širok spektar imunotestova. RIA i ELISA su obje tehnike imunotestiranja. RIA je tehnika imunotestiranja za otkrivanje kompleksa antigen-antitijelo korištenjem radioizotopa. ELISA je tehnika imunotestiranja za otkrivanje kompleksa antigen-antitijelo korištenjem enzima. Dakle, ovo je sažetak razlike između RIA i ELISA.
