Koja je razlika između pBR322 i pUC19

2024 Autor: Alex Aldridge | [email protected]. Zadnja izmjena: 2023-12-17 13:33

Ključna razlika između pBR322 i pUC19 je u tome što je pBR322 plazmidni vektor dužine 4361 bazni par, dok je pUC19 plazmidni vektor dužine 2686 baznih parova.

Vektor za kloniranje je mali komad DNK koji se može stabilno održavati u organizmu. To je također mali komad DNK u koji se može umetnuti strani fragment DNK u svrhu kloniranja. Vektor sadrži važne karakteristike koje omogućavaju prikladno umetanje stranog DNK fragmenta u vektore, kao što su restrikcijska mjesta, selektivni marker, reporter gen i element ekspresije. Kloniranje je prvo izvedeno pomoću E.coli. Vektori za kloniranje za E. coli uključuju plazmide, bakteriofage, kozmide i bakterijske umjetne hromozome (BAC). Najčešći vektori su genetski modifikovani plazmidi. pBR322 i pUC19 su dvije vrste plazmidnih vektora.

Šta je pBR322?

pBR322 je plazmidni vektor. To je jedan od prvih široko korištenih vektora za kloniranje za E. coli. Ovaj vektor je prvi put kreiran 1977. godine u laboratoriji Herberta Boyera na Kalifornijskom univerzitetu u San Francisku. To je kružna dvolančana DNK duga 4361 par baza.

Slika 01: pBR322

Ovaj plazmid vektor ima posebne karakteristike. Normalno, ima dva gena otpornosti na antibiotike: gen bla koji kodira protein otpornosti na ampicilin (Amp^R) i gen tetA koji kodira rezistenciju na tetraciklin (Tet^R) proteina. Štaviše, sadrži porijeklo replikacije pMB1. Ovaj plazmidni vektor također ima rop gen koji kodira restriktor broja kopija plazmida. Nadalje, ovaj vektor ima jedinstvena restrikcijska mjesta za više od 40 restrikcijskih enzima. Jedanaest od tih četrdeset restriktivnih mjesta leži unutar Tet^R gena. Postoje dva restrikcijska mjesta za restrikcijske enzime HindIII i ClaI unutar promotora Tet^R gena. Nadalje, postoji šest vrlo važnih restrikcijskih mjesta unutar Amp^R gena. pBR322 je vektor za kloniranje sa malim brojem kopija. On daje otprilike 20 kopija plazmida po bakterijskoj ćeliji. Molekularna težina vektora je 2,83×10^{6 d altona.}

Šta je pUC19?

pUC19 je plazmidni vektor dužine 2686 parova baza. To je jedan u nizu plazmidnih vektora koje su kreirali Joachim Messing i saradnici. Rani rad na ovoj seriji plazmida obavljen je na Univerzitetu u Kaliforniji. To je kružna dvolančana DNK.

Slika 02: pUC19

Ovaj plazmid vektor takođe sadrži važne karakteristike. Ima N terminalni fragment gena β glaktozidaze (lacz). Takođe ima region višestrukog kloniranja (MCS). Ova regija je podijeljena na kodone 6 i 7 lacz gena. MCS regija pruža mnoga restrikcijska mjesta za endonukleaze. Pored gena za β glaktozidazu, pUC19 također kodira gen otpornosti na ampicilin (Amp^R). Štaviše, poreklo replikacije je izvedeno iz plazmida pMB1. Iako je pUC19 male veličine, ima veliki broj kopija (500-700 kopija po bakterijskoj ćeliji). Molekularna težina ovog plazmidnog vektora je 1,75×10^{6 d altona.}

Koje su sličnosti između pBR322 i pUC19?

• pBR322 i pUC19 su dva tipa plazmidnih vektora.
• Oni su popularni vektori za kloniranje coli.
• Oba plazmidna vektora imaju isto porijeklo oblika replikacije plazmida pMB1.
• Ovi vektori imaju višestruke restriktivne stranice.
• Oba plazmidna vektora imaju gen otpornosti na ampicilin kao selektabilni marker.

Koja je razlika između pBR322 i pUC19?

pBR322 je plazmidni vektor dužine 4361 parova baza, dok je pUC19 plazmidni vektor dužine 2686 baznih parova. Dakle, ovo je ključna razlika između pBR322 i pUC19. Nadalje, pBR322 je plazmid vektor s malim brojem kopija, dok je pUC19 plazmid vektor s velikim brojem kopija.

Infografika ispod predstavlja razlike između pBR322 i pUC19 u obliku tabele za usporedbu.

Sažetak – pBR322 vs pUC19

Najčešće korišćeni vektori za kloniranje za E.coli su genetski modifikovani plazmidi.pBR322 i pUC19 su dva tipa plazmidnih vektora. pBR322 je plazmidni vektor dužine 4361 par baza, dok je pUC19 plazmidni vektor dužine 2686 parova baza. Dakle, ovo je ključna razlika između pBR322 i pUC19.