Ključna razlika između apsorpcije i fluorescencije je u tome što možemo koristiti tehniku analize apsorpcije za direktno mjerenje količine specifične talasne dužine koju uzorak apsorbira bez razrjeđivanja ili pripreme za analizu, dok fluorescentna analiza zahtijeva pripremu uzorka u kojoj uzorak od interesa mora biti povezan sa fluorescentnim reagensima u kompletu za analizu.
Apsorbancija i fluorescencija su važne analitičke tehnike koje možemo koristiti za otkrivanje različitih svojstava u datom uzorku.
Šta je upijanje?
Apsorbanca je mera kapaciteta supstance da apsorbuje svetlost određene talasne dužine. Konkretno, ona je jednaka logaritmu recipročne vrijednosti propusnosti. Za razliku od optičke gustine, apsorbancija mjeri količinu svjetlosti koju apsorbuje supstanca.
Dalje, spektroskopija mjeri apsorbanciju (koristeći kolorimetar ili spektrofotometar). Apsorbancija je bezdimenzionalno svojstvo, za razliku od većine drugih fizičkih svojstava. Postoje dva načina da se objasni apsorpcija: kao svjetlost koju apsorbira uzorak ili kao svjetlost koja se prenosi kroz uzorak. Jednačina za izračunavanje apsorpcije je sljedeća:
A=log10(I0/I)
Gdje je A apsorbanca, I0 je zračenje preneseno iz uzorka, a I je upadno zračenje. Sljedeća jednačina je također slična gornjoj jednačini u smislu propusnosti (T).
A=-log10T
Šta je fluorescencija?
Fluorescencija je emisija svjetlosti iz supstance koja je prethodno apsorbirala energiju. Takve tvari moraju apsorbirati svjetlost ili bilo koje drugo elektromagnetno zračenje da bi emitirale svjetlost u obliku fluorescencije. Štaviše, ova emitovana svetlost je vrsta luminiscencije, što znači da emituje spontano. Emitovana svetlost često ima veću talasnu dužinu od apsorbovane svetlosti. To znači da je emitovana svjetlosna energija niža od apsorbirane energije.
Tokom procesa fluorescencije, svjetlost se emituje kao rezultat ekscitacije atoma u tvari. Apsorbirana energija se često oslobađa u obliku luminiscencije u vrlo kratkom vremenskom periodu, oko 10-8 sekundi. To znači da možemo uočiti fluorescenciju čim uklonimo izvor zračenja koji izaziva ekscitaciju.
Postoje mnoge primjene fluorescencije u različitim poljima, kao što su mineralogija, gemologija, medicina, hemijski senzori, biohemijska istraživanja, boje, biološki detektori, proizvodnja fluorescentnih lampi, itd. Štaviše, ovaj proces možemo naći i kao prirodan proces; na primjer, u nekim mineralima.
Koja je razlika između apsorpcije i fluorescencije?
Apsorbanca i fluorescencija su važne analitičke tehnike koje možemo koristiti za otkrivanje različitih svojstava u datom uzorku. Ključna razlika između apsorpcije i fluorescencije je u tome što možemo koristiti tehniku analize apsorpcije za direktno mjerenje količine određene valne dužine koju uzorak apsorbira bez razrjeđivanja ili pripreme za analizu, dok fluorescentna analiza zahtijeva pripremu uzorka u kojem uzorak od interesa mora biti vezani sa fluorescentnim reagensima u kompletu za analizu. Štaviše, tehnika fluorescencije je efikasnija od apsorpcije jer je test fluorescencije visoko specifičan za ciljni analit.
Infografika ispod predstavlja razlike između apsorbancije i fluorescencije u tabelarnom obliku za jedno pored drugog poređenje
Sažetak – apsorpcija naspram fluorescencije
Apsorbanca je mera kapaciteta supstance da apsorbuje svetlost određene talasne dužine. Fluorescencija je emisija svjetlosti iz tvari koja je prethodno apsorbirala energiju. Ključna razlika između apsorpcije i fluorescencije je u tome što možemo koristiti tehniku analize apsorpcije za direktno mjerenje količine određene valne dužine koju uzorak apsorbira bez razrjeđivanja ili pripreme za analizu, dok fluorescentna analiza zahtijeva pripremu uzorka u kojem uzorak od interesa mora biti vezano sa fluorescentnim reagensima u kompletu za analizu.
