Ključna razlika – Transformanti vs Rekombinanti
Rekombinacija i transformacija su dva ključna koraka u genetskom inženjeringu, gdje se karakteristike organizma namjerno modificiraju manipulacijom njegovim genetskim materijalom. Rekombinacija je proces u kojem se strana DNK ugrađuje u vektorski genom i formira se rekombinantna DNK molekula. Transformacija je sljedeći korak u kojem se rekombinantni molekul unosi u organizam domaćina. Ćelija domaćin ili organizam olakšavaju ekspresiju rekombinantnog molekula. Ključna razlika između transformanata i rekombinanata je u tome što su transformanti ćelije ili organizmi koji uzimaju rekombinantnu molekulu unutra i olakšavaju ekspresiju, dok su rekombinanti vektori koji omogućavaju umetanje strane DNK u njen genom i transport u transformante domaćina radi ekspresije.
Šta su Transformanti?
Transformanti su ćelije ili organizmi u kojima se rekombinantna DNK preuzima za ekspresiju. Bakterije se obično koriste kao organizmi domaćini u genetskom inženjeringu jer se lako uzgajaju, razmnožavaju i rukuju u laboratorijskim uslovima, a proces transformacije je lak u poređenju sa drugim organizmima. Najpopularnija bakterija domaćina koja se koristi u genetskom inženjeringu je bakterija E coli.
Tokom procesa transformacije, ćelije domaćini su inducirane da preuzmu rekombinante. Međutim, neke ćelije domaćini ne preuzimaju rekombinantne molekule. Oni su poznati kao netransformanti, a ćelije koje sadrže rekombinantne DNK molekule su poznate kao transformanti. Selekcija transformanata od netransformanata se vrši pomoću selektivnih markera u molekularnoj biologiji. Selektivni markeri se ubacuju u vektorski genom zajedno sa DNK insertom. Često korišteni selektivni markeri su geni otporni na antibiotike. Markerski geni olakšavaju diferencijaciju transformanata i nastavljaju proces. Nakon procesa transformacije, bakterija se uzgaja u podlozi koja sadrži antibiotik. Samo transformanti mogu rasti na tom mediju jer posjeduju rekombinante unutra.
Kada se rekombinantni molekul DNK transformiše unutar organizma domaćina, strana DNK može ili biti integrisana u genom ćelije domaćina ili ostati neintegrisana u citoplazmi. Međutim, ekspresija i replikacija strane DNK se dešavaju u organizmu domaćina i proizvode željeni rezultat iz procesa.
Šta su rekombinanti?
Rekombinant je organizam ili ćelija koja poseduje rekombinovani genom koji sadrži stranu DNK. Rekombinanti su rezultat procesa genetskog inženjeringa. Oni su umjetno konstruirani in vitro umetanjem gena od interesa i modificiranjem genoma. Često bakterijski plazmidi i bakteriofagi djeluju kao rekombinanti u genetskom inženjeringu. Ima himeru različitih DNK. Rekombinantna DNK molekula nosi stranu DNK u organizam domaćina i čini je da se izrazi i formira željeni proizvod.
Rekombinantni molekuli su konstruisani upotrebom restrikcijskih endonukleaza i DNK ligaza. Željeni fragment DNK se odvaja od originalnog organizma i ubacuje u vektor kako bi se napravio rekombinant za transformaciju. Rezanje gena od interesa i otvaranje vektorskog organizma trebalo bi da se uradi koristeći isti restrikcijski enzim kako bi se stvorili kompatibilni ljepljivi krajevi koji će ih spojiti zajedno. Kada se strana DNK ugradi u vektorski genom, poznata je kao rekombinantna ili rekombinantna DNK molekula.
Slika 02: Rekombinantna DNK
Koja je razlika između transformanata i rekombinantnih?
Transformanti vs Rekombinanti |
|
| Transformanti su ćelije koje u sebi imaju rekombinantni DNK molekul. | Rekombinanti su molekuli nosači koji imaju stranu DNK ubačenu u vlastiti genom. |
| Izraz stranog DNK | |
| One su ćelije domaćini koje su u stanju da eksprimiraju rekombinantnu DNK. | Oni bi trebali biti u stanju da se samorepliciraju unutar organizma domaćina. |
| Izbor | |
| Ćelije koje se lako mogu uzgajati i razmnožavati se biraju kao ćelije domaćini. | Moraju se lako izvući i treba da sadrže markere koji se mogu odabrati. |
Sažetak – Transformanti vs Rekombinanti
Transformanti su ćelije ili organizmi sa rekombinantnim DNK molekulima unutar njih. Rekombinanti su organizmi ili ćelije koje su prošle genetsku rekombinaciju i imaju stranu DNK u svom genomu. Bakterijske ćelije se često koriste kao ćelije domaćini za transformaciju, a plazmidi i bakteriofagi se često koriste kao vektori u tehnologiji rekombinantne DNK. Ovo je razlika između transformanata i rekombinanata.
