Ključna razlika – primarna ćelijska kultura naspram ćelijske linije
Oblast istraživanja je napravila veliki zaokret sa uvođenjem kultivacije ćelija i upotrebom ćelijskih linija za istraživanje. Na veštački pripremljenim ćelijama i ćelijskim linijama rade se različiti testovi kako bi se procenilo ponašanje ćelije. Većina istraživanja na ljudima zahtijeva kultivaciju ćelija i ćelijske linije za validaciju rezultata, posebno kada se istraživačke studije temelje na farmakologiji i otkriću lijekova. Primarna ćelijska kultura je kultura pripremljena direktnom izolacijom ćelija mehaničkim ili enzimskim metodama. Ćelijska linija se priprema kontinuiranim pasiranjem primarne ćelijske kulture kako bi se dobila ćelijska linija koja je stekla homologne karakteristike. Ključna razlika između primarne ćelijske kulture i ćelijske linije je broj pasaža koje svaka od njih ima. Primarna ćelijska kultura je direktno izolirana, dok se ćelijska linija priprema nekoliko puta pasiranjem primarne ćelijske kulture.
Šta je primarna ćelijska kultura?
Primarna ćelijska kultura je preparat ćelijske kulture izolacijom ćelija direktno iz izvora mehaničkim ili enzimskim metodama. Ćelije se izoluju metodom tripsinizacije ili ne-tripsinizacijom. Primarne ćelijske kulture se uzgajaju u odgovarajućim podlogama za rast koji sadrže faktore rasta, hormone, lipide i druge nedefinirane komponente. Određene podloge moraju biti praćene serumom. Mediji osiguravaju da su uslovi za rast optimizovani, a ćelije opstaju u optimalnim uslovima. Ćelije se mogu izolovati iz različitih izvora tkiva kao što je tkivo jetre, endotel i neuralno tkivo kod ljudi ili viših životinja putem tripsinizacije.
Prilikom izolacije ćelija iz biljaka i mikroorganizama koriste se posebni postupci ekstrakcije koji koriste i mehaničke i hemijske metode. Ove izolovane ćelije se mogu imobilizirati na čvrsti nosač ili se mogu prenijeti kroz nekoliko generacija da bi se razvile u ćelijsku liniju.
Primarne ćelijske kulture su uglavnom dva tipa; Adherentne ćelijske kulture i suspenzije ćelijske kulture. Adherentne primarne ćelijske kulture zavise od sidrenja i zahtijevaju čvrstu podršku za rast. Adherentne primarne ćelijske kulture uglavnom potiču iz tkiva ili organa. Suspenzirane primarne ćelijske kulture su nezavisne od sidrišta i rastu u tečnim medijima. Suspenzirane kulture treba kontinuirano miješati tokom faze rasta. Primarne ćelijske kulture suspenzije mogu se direktno dobiti iz krvi.
Primarne ćelijske kulture imaju relativno kraći životni vek, ali informacije dobijene iz primarnih ćelijskih kultura u uslovima in vitro pružaju osnovnu osnovu za mnoga istraživanja. Oni su korisni za proučavanje karakteristika ćelija, kako morfološkog tako i hemijskog ponašanja.
Šta je ćelijska linija?
Ćelijske linije se široko koriste u istraživanjima i trenutno su ćelijske linije kao što su ćelijske linije raka, ćelijske linije jetre i ćelijske linije bubrega komercijalno dostupne u istraživačke svrhe. Ćelijske linije se pripremaju kontinuiranim pasiranjem primarne ćelijske kulture. Pasiranje se odnosi na proces subkulturiranja u kojem se ćelijske kulture razvijaju u ćelijsku liniju. Ove ćelijske linije su kulture u dvodimenzionalnim ili trodimenzionalnim matricama i održavaju se kao ćelijske linije.
Ćelijske linije su klasifikovane kao konačne i kontinuirane ćelijske linije. Konačne ćelijske linije su podvrgnute određenom broju pasaža (20 – 30 pasaža). Po završetku potrebnog broja pasaža, ćelijska linija ulazi u fazu starenja. Ovim ćelijama se lako rukuje jer je njihov rast definitivan. Kontinuirane ćelijske linije se takođe nazivaju besmrtnim ćelijskim linijama. Ove ćelijske linije nemaju određen broj prolaza. Rastu neograničeno i stoga mogu dobiti mutacije. Stoga se kontinuirane ćelijske linije lako mutiraju i tako mijenjaju svoje morfološke i genetske karakteristike, za razliku od konačnih ćelijskih linija.
Slika 01: Ćelijska linija
Ćelijske linije se koriste jer je to praktičnije od upotrebe primarne ćelijske kulture jer se može koristiti iznova i iznova tokom određenog perioda. Ali sklonija je mutacijama i kontaminacijama kako se povećava njihova proliferacija.
Koje su sličnosti između primarne ćelijske kulture i ćelijske linije?
- I ćelijska kultura i tipovi ćelija ćelija se koriste u istraživanju za proučavanje morfoloških, hemijskih i genetskih karakteristika ćelije.
- I ćelijske kulture i ćelijske linije vrste ćelija se ekstrahuju mehaničkim i enzimskim metodama.
- I tipovi ćelija i ćelijske kulture i ćelijske linije zahtijevaju medij za rast i specifične uslove rasta.
- I ćelijske kulture i ćelijske linije su sklone mutacijama.
Koja je razlika između primarne ćelijske kulture i ćelijske linije?
Primarna ćelijska kultura vs ćelijska linija |
|
| Primarna ćelijska kultura je kultura pripremljena direktnom izolacijom ćelija mehaničkim ili enzimskim metodama. | Ćelijska linija je pripremljena kontinuiranim propuštanjem primarne ćelijske kulture da bi se dobila ćelijska linija koja je dobila homologne karakteristike. |
| Broj prolaza | |
| Primarne ćelijske kulture se ne pasiraju, ćelije se održavaju u uslovima kulture. | Ćelije se prolaze definitivno ili neograničeno u stvaranju ćelijskih linija. |
| Tipovi | |
| Adherentna primarna ćelijska kultura i suspenzija primarna ćelijska kultura su dvije vrste primarnih ćelijskih kultura. | Konačna ćelijska linija i kontinuirana ćelijska linija su dvije vrste ćelijskih linija. |
| Životni vijek | |
| Primarne ćelijske kulture imaju kratak životni vijek. | Ćelijske linije imaju duži životni vijek. |
Sažetak – Primarna ćelijska kultura vs ćelijska linija
Primarne ćelijske kulture i ćelijske linije se široko koriste u istraživanjima za proučavanje obrazaca ponašanja različitih ćelija u različitim uslovima i pod različitim farmakološkim aspektima. Primarne ćelijske kulture se direktno izoluju iz izvornog organa ili tkiva i uzgajaju se na medijumu za kulturu. Uslovi su optimizovani za rast specifičnih ćelija. Nasuprot tome, ćelijske linije se pripremaju pasiranjem primarnih ćelijskih kultura konačan ili beskonačan broj puta. Ćelijske linije su komercijalno dostupne i popularne su među istraživačima zbog jednostavnosti upotrebe.
